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干細胞培養基作用與存放要求

更新時間:2025-05-23點擊次數:106
  干細胞培養基是細胞培養的核心成分,其作用是為干細胞提供必要的營養、生長因子、pH緩沖和無菌環境,以維持細胞的存活、增殖和分化。
  一、干細胞培養基的作用:
  提供基礎營養:
  氨基酸、糖類、維生素:為細胞代謝提供能量和原料。
  無機鹽:維持滲透壓和離子平衡。
  支持細胞生長與增殖:
  血清(如FBS胎牛血清):提供生長因子、激素、脂蛋白等,促進細胞貼壁和增殖。
  重組生長因子:誘導干細胞自我更新,抑制分化。
  維持pH穩定:
  通過緩沖系統中和代謝產生的酸性物質,保持培養基pH在7.2~7.4范圍內。
  防止污染:
  添加抗生素預防細菌污染(注意:長期使用可能影響細胞狀態)。
  培養基本身需無菌,通常經過過濾除菌。
  調節滲透壓:
  通過電解質濃度控制滲透壓,避免細胞因滲透壓失衡而破裂或皺縮。
  支持特定細胞需求:
  根據干細胞類型(如胚胎干細胞、間充質干細胞、神經干細胞)添加特異性成分。
  二、干細胞培養基存放要求:
  1. 未開封培養基的存放
  低溫保存:
  基礎培養基應存放于4℃冰箱,避免反復凍融。
  添加血清或生長因子后的培養基需根據成分調整:
  含血清的培養基:短期可存于4℃,長期(>1周)需-20℃冷凍,使用前解凍。
  無血清培養基:建議小量分裝,4℃保存(部分需-20℃)。
  避光保存:
  某些成分(如谷氨酰胺、生長因子)對光照敏感,需用錫箔紙包裹或存放在深色容器中。
  保質期限制:
  基礎培養基開封后建議1個月內用完,含血清的培養基最好2周內使用。
  2. 配制后培養基的存放
  無菌操作:
  配制時在超凈臺內完成,避免微生物污染。
  分裝至無菌容器(如培養瓶、離心管),密封后標記配制日期。
  短期存放:
  4℃保存,不超過1周(含血清培養基)。
  無血清培養基可存于4℃或按說明書要求冷凍。
  長期存放:
  冷凍,使用前需緩慢解凍。
  3. 特殊注意事項
  避免反復凍融:
  凍融會導致血清蛋白變性、生長因子失活,建議分裝成單次用量后冷凍。
  禁止陽光直射:
  存放位置遠離窗戶或強光,防止光敏成分降解。
  定期檢查:
  觀察培養基是否渾濁、沉淀或變色,若出現異常則丟棄。
 

 

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